​苹果酸脱氢酶(NAD-MDH)试剂盒样本测定的准备

2024-10-24

苹果酸脱氢酶(NAD-MDH)试剂盒样本测定的准备:

1、细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为1000~5000:1的比例(建议2000万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。接下来,我们进入样品测定的关键步骤——样品预处理与检测准备。对于血清(浆)样品,由于其相对均一且已处于液态,无需复杂的破碎或匀浆过程,直接取适量血清(浆)样本,按实验需求稀释或直接加入检测板中,确保每个样本孔内体积一致,以消除体积差异对检测结果的影响。此时,需特别注意避免气泡产生,以免影响后续光学读取的准确性。

随后,进行标准曲线的绘制。准备一系列已知浓度的标准品,按照与样品相同的处理流程加入到检测板中,确保标准品与待测样品在同一条件下进行检测,以建立浓度与信号值之间的线性关系。这一步骤对于结果的定量分析至关重要,它确保了实验结果的准确性和可靠性。

在完成上述所有准备工作后,进入正式的检测阶段。根据实验所采用的试剂盒或仪器说明,设定好相应的检测参数,如温度、时间、波长等,启动检测程序。期间,需密切关注仪器的运行状态,确保无异常情况发生。同时,记录好每个步骤的时间点和关键操作,以便后续数据分析和问题追溯。

待检测程序完成后,收集并整理检测数据,利用标准曲线进行结果计算。对于异常值或不符合预期的结果,需进行复检或进一步分析,以确认其真实性及可能的原因。最后,将实验结果整理成报告,包括实验方法、步骤、数据、图表及结论等,供后续研究或临床应用参考。