植物ATP合成酶(ATPsynthase)ELISA试剂盒试剂准备
1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37oC溶解。
2. 标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入150μL的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成不同的梯度, 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。3. 检测溶液A和检测溶液B:在使用前应轻轻摇匀,以避免因试剂沉淀导致浓度不均。检测溶液应避免长时间暴露于光线下,使用完毕后应立即盖紧瓶盖并储存于推荐的条件下,以保持其活性及稳定性。
4. 洗涤缓冲液:若试剂盒中提供的是浓缩洗涤缓冲液,需按照说明书指示的比例用蒸馏水或去离子水稀释至工作浓度。确保洗涤缓冲液已完全溶解并混合均匀后再使用,以避免洗涤不充分影响实验结果。
5. 底物溶液:底物溶液应在临用前配制,并注意避光保存,因其对光敏感,易分解导致颜色反应减弱。根据实验需求,适量配制,避免浪费。
6. 终止液:通常为酸性溶液,用于停止酶促反应,使颜色变化固定。使用时应小心操作,避免溅入眼睛或皮肤,一旦接触应立即用大量清水冲洗,并寻求医疗帮助。
完成上述试剂准备后,即可按照ELISA试剂盒提供的具体步骤进行实验操作。每一步操作都应严格遵守说明书指导,确保实验条件的准确性和一致性,从而获得可靠、可重复的实验结果。