环孢子虫探针法荧光定量PCR试剂盒的选择要点
特异性与灵敏度
优先选择基于环孢子虫保守序列设计的引物和探针,确保与其他微生物无交叉反应。
探针法通过特异性结合目标序列释放荧光信号,灵敏度可达100拷贝/反应,适合低浓度样本检测。
操作便捷性
即
开即用型试剂盒(如含预混PCR mix)可减少操作步骤,适合快速检测。
部分产品提供上样染料或阳性对照,便于结果分析。
定量能力与线性范围
确认试剂盒的线性范围(如5个数量级),确保覆盖目标样本的浓度梯度。
探针法比染料法(如SYBR Green)更适合绝对定量,因荧光信号与目标序列严格对应。
兼容性与稳定性
选择适配主流荧光定量PCR仪(如ABI、LightCycler)的试剂盒。
注意储存条件(通常为-20℃避光)和有效期(12个月)。
成本与用途
探针法试剂盒价格通常高于染料法(如50次反应约3490元),但特异性更优。
科研用途需确认是否含活体样本对照,部分产品仅提供DNA片段作为阳性对照。
注意事项
若样本量少或模板短,建议选择含热启动Taq酶的试剂盒以减少非特异性扩增。
避免反复冻融,运输时需低温避光。