以下是NADH氧化酶（NOX）测试盒的详细操作步骤，综合了多个试剂盒说明书中的关键信息：
一、样本前处理
组织/细胞样本处理
称取0.1g组织或收集500万细胞，加入1mL试剂一和10μL试剂三，冰浴匀浆。
600g、4℃离心5分钟，弃沉淀；上清液11000g、4℃离心10分钟，上清为胞浆蛋白（可选测线粒体泄漏的NOX）。
沉淀（线粒体）加入200μL试剂二和2μL试剂三，冰浴超声破碎（功率20%或200W，超声3秒间隔10秒，重复30次）。
血清/浆样品
直接检测，无需前处理。
二、测定步骤
仪器准备
分光光度计预热30分钟，波长调至600nm，蒸馏水调零。
反应体系配制
37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）预孵育试剂四、五、六5分钟。
在1mL石英比色皿中加入：40μL样本、700μL试剂四、100μL试剂五、160μL试剂六，混匀。
检测与计算
记录600nm处20秒（A1）和1分20秒（A2）的吸光值，计算ΔA=A1-A2。
三、注意事项
试剂保存：试剂六需临用前配制，分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
样本量调整：若样本量增加，需按比例调整提取液体积（如组织质量:提取液=1:5~10）。