在ELISA检测中，批间变异率（inter-assay variation）是评估实验重复性和稳定性的重要指标。
1. 数据采集与计算
连续测定：在相同条件下，对同一浓度质控物进行至少20次独立批次的检测。
统计参数：计算均值和标准差（SD），批间变异率公式为：
批间CV%= SD×100%
均值
例如，若20次检测的均值为100，SD为5，则批间CV%为5%。
2. 可接受标准
与操作变异率（OCV）对比：批间CV%应接近或小于2倍OCV。通常ELISA的OCV需<15%，自动化系统需<10%。
临床要求：免疫检测中，批间CV%一般需<15%（手工操作）或<10%（自动化仪器）。
3. 异常处理
若批间CV%超标，需排查以下问题：
试剂稳定性：检查试剂批号是否一致，储存条件是否合规。
操作一致性：确保加样、孵育时间、洗涤步骤等标准化。
设备校准：验证酶标仪或洗板机的性能是否稳定。
4. 数据分析方法
批间变异率通常通过变异系数（CV，Coefficient of Variation）来量化，计算公式为：
\[ CV = \frac{\text{标准差（SD）}}{\text{平均值（Mean）}} \times 100\% \]
实际操作中，需计算多批次间同一质控样本或标准品的CV值。例如，若连续3次检测某样本的OD值分别为1.2、1.5、1.3，其平均值为1.33，标准差为0.13，则CV为9.8%。通常，批间CV应控制在15%以内，严格实验要求可能需低于10%。
5. 质量控制与优化
若批间变异率超出预期，需排查潜在因素：
- 试剂问题：检查抗体效价是否下降、酶标板是否受潮或过期。
- 操作差异：确认孵育时间、温度、洗板次数等是否一致。自动化设备比人工操作更能减少误差。
- 环境因素：实验室温湿度波动可能影响结果，需记录环境参数并优化条件。