作为血管生物学研究的重要基石，其精细操作流程犹如在微观世界搭建生命桥梁。随着肺动脉高压等心血管疾病研究的深入，肺动脉内皮细胞（PAECs）的培养技术成为探索发病机制及药物筛选的关键环节。近年来，该技术在细胞分离、培养基优化及功能表征方面取得了显著进展，为后续研究提供了更可靠的体外模型。
一、培养技术的精细化改进
传统PAECs分离多依赖酶消化法，但易导致细胞活性受损。目前，"梯度离心联合免疫磁珠分选"（如CD31抗体标记）成为主流，可高效富集高纯度内皮细胞。此外，"无血清培养基的优化"成为趋势，例如添加VEGF、EGF等生长因子，既能维持细胞表型，又可减少血清批次差异对实验的干扰。三维培养体系的引入（如基质胶模拟血管微环境）进一步提升了细胞的生理相关性。
二、质量控制与功能验证
培养后的PAECs需通过**形态学观察**（铺路石样排列）、"标志物检测"（vWF、CD31阳性表达）及功能实验（如低密度脂蛋白摄取、血管形成实验）进行验证。值得注意的是，传代次数需严格控制（建议≤5代），以避免细胞去分化。
三、应用前景与挑战
PAECs培养技术的成熟推动了"疾病建模"（如构建肺动脉高压体外模型）和"个性化治疗"（利用患者原代细胞筛选药物）的发展。然而，如何长期维持细胞功能稳定性、解决供体个体差异仍是难点。未来，类器官技术与微流控芯片的结合可能为动态模拟血管病理生理提供新思路。
总之，PAECs培养技术的革新不仅为基础研究铺路，更为临床转化开辟了可能性，其发展需多学科协作攻克现存瓶颈。