在细胞培养实验中,使用胎牛血清或其他动物血清时,常会遇到解冻后出现浑浊或颗粒状物质的情况。这些现象多为正常物理性沉淀,而非微生物污染。正确识别有助于避免误判导致的资源浪费和实验中断 。
血清沉淀确实容易让人困惑,怎样快速区分它们。核心方法就是看形态、做镜检、结合培养温度来综合判断。
一、肉眼观察形态
纤维蛋白沉淀:解冻后常出现肉眼可见的絮状物,大小约1-2mm,像棉絮一样悬浮在血清中。
磷酸钙沉淀:通常导致血清变浑浊,静置后可能形成白色颗粒沉淀。
二、显微镜下观察
纤维蛋白沉淀:在倒置显微镜下呈现为较大的絮状结构,不会移动。
磷酸钙沉淀:镜下可见小黑点,由于布朗运动会四处游动,常被误认为微生物污染。
三、结合培养温度判断
磷酸钙沉淀:在37℃培养时析出会明显增加,导致血清更浑浊。
纤维蛋白沉淀:受温度影响较小,解冻后即可出现。
四、其他沉淀类型
胆固醇、脂肪酸酯等:也可能形成沉淀,但通常较少见,需结合具体实验条件判断。
五、注意事项
避免误判:磷酸钙沉淀的小黑点易与细菌混淆,但细菌会快速增殖导致培养基浑浊,而沉淀不会。
处理建议:若需去除沉淀,可通过2000rpm离心5分钟取上清。