产品介绍
细胞名称:人脐静脉细胞融合细胞
形态特性:内皮细胞
生长特性:贴壁生长
特征特性:在PEG胁迫下,将原代培养的人脐静脉细胞与抗硫鸟嘌呤的A549克隆株融合,构建了人脐静脉细胞株, EA.hy926。 融合子在HAT培养基上生长并以八因子相关抗原筛选。 EA.hy926已经过100次以上的群体倍增(PDLs)。 电镜照片显示Weibel-Palade小体的细胞质分布以及组织特异性的细胞器,分化的内皮细胞特性如血管生成,体内平衡/血栓形成,血压及炎症反应。 [PubMed: 6407019] [PubMed: 2079463]
培养条件
传代方法:消化3-5分钟。1:
2。3天内可长满。
传代情况: PN5
冻存条件:完全培养基+8%DMSO
产品名称 | 人脐静脉细胞融合细胞 |
英文简称 | EA.hy926 |
状态 | 贴壁 |
细胞冷冻保存:
1.冻存液:92%完全培养基+8%DMSO(可以根据实验室条件自行选择)
2.降温步骤:4度10min,-20度2h,-80过夜后液氮保存。
细胞培养的操作步骤:
1.人脐静脉细胞融合细胞吸走用于培养基,加入3-5mL PBS后轻轻晃动培养瓶润洗细胞;
2.吸干净PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,轻轻摇晃培养皿使胰酶浸没细胞表面,培养瓶放37度培养箱消化;
(细胞对于消化比较敏感,消化过度会严重影响细胞状态,导致细胞传代死亡漂浮或者传代后不长。细胞消化到细胞间隙变大但未脱落,可以轻轻吹下时即可终止,禁止消化到细胞完全漂浮。混匀细胞时尽量轻柔,不要吹出大量气泡。)
3.加入6-8ml完全培养基终止消化,轻轻吹下细胞混匀;
4.将混匀的细胞1000rpm(约150g)离心3min,弃上清,再用新鲜培养基重悬37度培养箱继续培养;
传代比例: 不同细胞生长速度不一,具体传代比例视细胞生长速度而定,大部分细胞适用1:3-1:4传代,生长较慢的细胞可以1:2传代。