产品介绍
细胞名称:人小细胞肺癌细胞
形态特性:上皮样
生长特性:悬浮聚集生长
特征特性:该细胞由Gazdar AF及其同事于1979年从一名小细胞肺癌患者的骨髓转移灶中分离建立,该骨髓标本的获取先于患者的治疗。该细胞是一种典型的小细胞性肺癌细胞,表达较高水平的4种生化标志:
神经特异性烯醇、肌酸激酶脑型同工酶、左旋多巴脱羧酶、铃蟾肽样免疫活性。c-myc DNA序列没有扩增;未发现大的结构DNA的异常;该细胞合成与正常肺相当量的p53 mRNA。该细胞以聚集体的形式悬浮生长,只有聚集体中的细胞是有活力的,但是细胞活率无法估计,一般培养基
传代方法: 1:
2传代;5~7天1次。
传代情况: C5
冻存条件:基础培养基+5%DMSO+20%FBS
产品名称 | 人小细胞肺癌细胞 |
英文简称 | NCI-H209 |
状态 | 贴壁 |
细胞冷冻保存:
1.冻存液:92%完全培养基+8%DMSO(可以根据实验室条件自行选择)
2.降温步骤:4度10min,-20度2h,-80过夜后液氮保存。
细胞培养的操作步骤:
1.人小细胞肺癌细胞吸走用于培养基,加入3-5mL PBS后轻轻晃动培养瓶润洗细胞;
2.吸干净PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,轻轻摇晃培养皿使胰酶浸没细胞表面,培养瓶放37度培养箱消化;
(细胞对于消化比较敏感,消化过度会严重影响细胞状态,导致细胞传代死亡漂浮或者传代后不长。细胞消化到细胞间隙变大但未脱落,可以轻轻吹下时即可终止,禁止消化到细胞完全漂浮。混匀细胞时尽量轻柔,不要吹出大量气泡。)
3.加入6-8ml完全培养基终止消化,轻轻吹下细胞混匀;
4.将混匀的细胞1000rpm(约150g)离心3min,弃上清,再用新鲜培养基重悬37度培养箱继续培养;
传代比例: 不同细胞生长速度不一,具体传代比例视细胞生长速度而定,大部分细胞适用1:3-1:4传代,生长较慢的细胞可以1:2传代。