产品介绍
细胞名称:人急性早幼粒白血病细胞
形态特性:淋巴母细胞样
生长特性:悬浮生长
特征特性:该细胞由Collins SJ从一位患有急性早幼粒细胞性白血病的36岁白人女性的外周血中分离建立;可自发分化,或在丁酸盐、次黄嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(1% to 1.5%)、放线菌素D和视黄酸的刺激下发生分化;PMA刺激后可分泌TNF-α。该细胞具有吞噬活性和趋化反应,癌基因myc阳性,表达补体受体和FcR(来源于药物所)。
培养条件: RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法: 1:
3传代,2-3天传一代
传代情况: C49
冻存条件:基础培养基+5%DMSO+20%FBS
产品名称 | 人急性早幼粒白血病细胞 |
英文简称 | HL-60 |
状态 | 贴壁 |
细胞冷冻保存:
1.冻存液:92%完全培养基+8%DMSO(可以根据实验室条件自行选择)
2.降温步骤:4度10min,-20度2h,-80过夜后液氮保存。
细胞培养的操作步骤:
1.人急性早幼粒白血病细胞吸走用于培养基,加入3-5mL PBS后轻轻晃动培养瓶润洗细胞;
2.吸干净PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,轻轻摇晃培养皿使胰酶浸没细胞表面,培养瓶放37度培养箱消化;
(细胞对于消化比较敏感,消化过度会严重影响细胞状态,导致细胞传代死亡漂浮或者传代后不长。细胞消化到细胞间隙变大但未脱落,可以轻轻吹下时即可终止,禁止消化到细胞完全漂浮。混匀细胞时尽量轻柔,不要吹出大量气泡。)
3.加入6-8ml完全培养基终止消化,轻轻吹下细胞混匀;
4.将混匀的细胞1000rpm(约150g)离心3min,弃上清,再用新鲜培养基重悬37度培养箱继续培养;
传代比例: 不同细胞生长速度不一,具体传代比例视细胞生长速度而定,大部分细胞适用1:3-1:4传代,生长较慢的细胞可以1:2传代。