上海一研生物科技有限公司

产品介绍

细胞名称：Hela细胞耐药亚株

形态特性：上皮细胞样

生长特性：贴壁生长

特征特性： Hela/DDP细胞是湖医二院肿瘤所陈惠桢教授等用药物剂量增选法筛选获得的Hela细胞耐药亚株。该细胞除耐顺铂（DDP）外，其它特性均与Hela细胞系相似，可用于常规的耐药研究。

培养条件： MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts) 10%FBS  

传代方法： 1：

3传代,2-3天传一代  

传代情况： C30

冻存条件：基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

细胞冷冻保存：

1.冻存液：92%完全培养基+8%DMSO（可以根据实验室条件自行选择）

2.降温步骤：4度10min，-20度2h，-80过夜后液氮保存。

细胞培养的操作步骤：

1.Hela细胞耐药亚株吸走用于培养基，加入3-5mL PBS后轻轻晃动培养瓶润洗细胞；

2.吸干净PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA，轻轻摇晃培养皿使胰酶浸没细胞表面，培养瓶放37度培养箱消化；

（细胞对于消化比较敏感，消化过度会严重影响细胞状态，导致细胞传代死亡漂浮或者传代后不长。细胞消化到细胞间隙变大但未脱落，可以轻轻吹下时即可终止，禁止消化到细胞完全漂浮。混匀细胞时尽量轻柔，不要吹出大量气泡。）

3.加入6-8ml完全培养基终止消化，轻轻吹下细胞混匀；

4.将混匀的细胞1000rpm（约150g）离心3min，弃上清，再用新鲜培养基重悬37度培养箱继续培养；

传代比例: 不同细胞生长速度不一，具体传代比例视细胞生长速度而定，大部分细胞适用1:3-1:4传代，生长较慢的细胞可以1:2传代。