上海一研生物科技有限公司

产品介绍

细胞名称：人神经母细胞瘤

形态特性：上皮样细胞

生长特性：贴壁悬浮混合生长

特征特性：该细胞系来源于1970年建立的一神经母细胞瘤患者的转移骨瘤灶细胞SK-N-SH经三次克隆后的亚系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。 该细胞显示中等水平的多巴胺-β-羟基酶活性。 SH-SY5Y细胞的生长密度可高达1X106细胞/cm2，生长成悬浮和贴壁混合生长，有的聚集成细胞丛

培养条件： DMEM-H：

Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter
传代方法： 1：

3传代；3-4天一次  

传代情况： PN8

冻存条件：基础培养基+5%DMSO+20%FBS

细胞冷冻保存：

1.冻存液：92%完全培养基+8%DMSO（可以根据实验室条件自行选择）

2.降温步骤：4度10min，-20度2h，-80过夜后液氮保存。

细胞培养的操作步骤：

1.人神经母细胞瘤吸走用于培养基，加入3-5mL PBS后轻轻晃动培养瓶润洗细胞；

2.吸干净PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA，轻轻摇晃培养皿使胰酶浸没细胞表面，培养瓶放37度培养箱消化；

（细胞对于消化比较敏感，消化过度会严重影响细胞状态，导致细胞传代死亡漂浮或者传代后不长。细胞消化到细胞间隙变大但未脱落，可以轻轻吹下时即可终止，禁止消化到细胞完全漂浮。混匀细胞时尽量轻柔，不要吹出大量气泡。）

3.加入6-8ml完全培养基终止消化，轻轻吹下细胞混匀；

4.将混匀的细胞1000rpm（约150g）离心3min，弃上清，再用新鲜培养基重悬37度培养箱继续培养；

传代比例: 不同细胞生长速度不一，具体传代比例视细胞生长速度而定，大部分细胞适用1:3-1:4传代，生长较慢的细胞可以1:2传代。