包装与品牌:
产品名称 | 规格 | 品牌 |
酵母质粒DNA小量提取试剂盒 | 50次/100次 | 一研 |
产品介绍:
保存条件
RNase A:-20℃保存。RNase A为浑浊溶液。初次使用本试剂盒时,请将RNase A全部加入到溶液Ⅰ中,均匀混合后于4℃保存。可保存6个月。
其他试剂:室温保存。
若溶液YⅡ出现沉淀,请于37℃保温溶解,待恢复至室温后使用。沉淀的出现不会影响质粒DNA的纯化结果。
产品说明
本产品采用了经典的硅胶膜及碱裂法技术,用于酵母质粒DNA小量纯化。纯化原理是用溶壁酶消化酵母细胞的细胞壁,碱裂解酵母细胞后,硅胶膜柱高效可逆地吸附体系中的质粒DNA(高盐、低pH值),蛋白及其它杂质不被吸附而被除去,被吸附的DNA在低盐、高pH值条件下再被洗脱纯化。一次可从1-5 ml(不超过5×107个)的过夜培养的酵母菌液中纯化高纯度质粒DNA(OD260/280 = 1.7-1.9),此质粒DNA可直接用于DNA序列分析以及各种酶促反应等。
注意事项
1 溶壁酶需要客户另行购买(货号:N9032、N9031)。
2 通常酵母质粒拷贝数都很低,一般通过电泳或者分光光度计法都很难检测到。提取的质粒DNA如用于下列实验,通常建议使用量为:
用作PCR 模板:1–5μl质粒DNA。
转化大肠杆菌:5–10μl 质粒DNA。
3 所有离心步骤均为使用常规台式离心机室温下进行离心,速度为12,000 rpm(约13,400×g)。
4 所有离心步骤均为使用常规台式离心机室温下进行离心,速度为12,000 rpm(约13,400×g)。
5 溶液 Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA片段可直接用于各种酶促反应等,不会影响后续试验。
产品特点
高纯度:OD260/280= 1.8-2.0。无须经酚/氯仿抽提,可直接使用。
产品用途
PCR扩增
转化
注意事项:
● RNA样本保存液如出现沉淀,37℃加热振荡混匀。
● 加入RNA样本保存液后,样本不能立即置于-20℃或-80℃,要先4℃置放过夜,待组织充分浸润后再置于低温保存。
● 样品浸没在RNA样本保存液中,可在37℃保存1天,25℃保存1周,4℃保存1个月,-20℃长期保存;使用时请注意保存时限。
● 保存在RNA样本保存液中的样本可不经特殊处理,离心或直接使用和新鲜组织一样的RNA提取方法提取RNA。
● RNA样本保存液可以配合各种常见的RNA提取试剂盒使用,如东盛、invitrogen、omega等公司出品的RNA提取试剂盒,不影响试剂盒操作,不影响提取所得RNA质量及其后续实验。