人血吸虫ELISA检测试剂盒实验操作步骤:
加样:在反应孔中加入待测样本,每个样本设立一个复孔以确保结果的准确性。同时,设立阴性对照孔和阳性对照孔,以监控实验的有效性和特异性。注意操作时应避免交叉污染,加样枪头需一次性使用。
温育:将加样后的反应板置于37℃恒温箱中温育,时间通常为30分钟至1小时,具体根据试剂盒说明书操作。温育过程中,应确保反应板密封良好,避免蒸发影响结果。
洗板:温育结束后,取出反应板,轻轻甩掉孔内液体,用洗涤液反复洗涤5次,每次洗涤后需彻底拍干,以去除未结合的成分。
加酶标抗体:在洗涤后的反应孔中加入酶标抗体,同样设立复孔。加样后,再次将反应板置于37℃恒温箱中温育,时间一般为30分钟。
显色:温育结束后,取出反应板,加入显色剂。在室温下避光显色10-15分钟,期间注意观察颜色变化,避免显色过度。
10. 终止反应:当阳性对照孔颜色适中时,加入终止液终止显色反应。此时,反应孔中的颜色将由蓝色变为黄色。
11. 结果判定:在终止反应后10分钟内,使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度值。根据阴性对照孔和阳性对照孔的吸光度值,结合样本的吸光度值,判断样本是否为人血吸虫阳性。光度值,判断样本是否为人血吸虫阳性。