AQP-4猪水通道蛋白4酶联免疫试剂盒常见问题解决方案

    该试剂盒用于科研实验，不用于临床诊断，适用于猪源性样本中水通道蛋白4（AQP-4）的定量检测。其检测原理为双抗体一步夹心法：利用包被了捕获抗体的微孔板，结合样本中的AQP-4抗原，再与HRP标记的检测抗体反应，最终通过TMB底物显色，在450nm波长下测定OD值，计算浓度

一、试剂盒选择与验证

‌种属特异性‌：猪AQP-4试剂盒需确认种属特异性，建议联系供应商获取猪源试剂盒或验证人源试剂盒的交叉反应性。

‌替代方案‌：若无猪源试剂盒，可参考人AQP-4 ELISA试剂盒操作流程，但需验证其在猪样本中的适用性。

二、操作流程优化

‌试剂准备‌：所有试剂需在室温（20-25℃）平衡15-30分钟；浓缩洗液按1:10比例用纯水稀释。

‌加样与孵育‌：每孔加50μL标准品、对照品或血清，建议先加阴性质控品，再按浓度由低到高加标准品；加生物素后振荡孵育2小时。

‌显色与读数‌：加底物TMB显色，酸终止后呈黄色；酶标仪450nm波长测OD值，通过标准曲线计算浓度。

三、样本处理与保存

‌样品处理‌：血清需澄清，浑浊或溶血需离心（13,000 RPM，5分钟）。

‌试剂保存‌：未用完的生物素和SA-POD可冷藏（2-8℃）保存3天。

四、结果分析与验证

‌标准曲线‌：每次实验需建立标准曲线，确保结果准确性。

‌交叉反应性验证‌：若使用人源试剂盒，需验证其在猪样本中的交叉反应性。