洗涤是ELISA操作步骤中至关重要，如果洗涤不当，会导致背景值高、假阳性结果以及实验重复性差等问题。 因此，必须严格按照试剂盒说明书规定的步骤、体积、时间和次数进行洗涤操作，例如使用多道加样器、吸管或洗板机等。下面通蔚为大家整理一些洗板小贴士，大家可以对照了解自己洗板操作是否正确。
1、洗涤液不要溢出孔。在ELISA洗涤过程，洗涤液溢出孔容易交叉污染相邻的孔，容易造成背景高，从而影响实验准确性，尤其是在前两次洗涤时，由于孔中残留的未结合的抗体或抗原浓度较高，溢出后更容易污染相邻孔，导致假阳性信号。
2、设置实验考虑孔位置。为了减少潜在的交叉污染，建议将空白孔、低浓度标准品孔和阴性对照组放置在ELISA板的边缘或单独的区域。这样可以尽量避免这些孔受到高浓度样本或标准品的影响。
正确的甩板方式对于减少交叉污染至关重要。甩板时，应将ELISA板倾斜，使液体流向一侧，然后在干净的吸水纸上轻拍，以吸干残留液体。避免旋转甩板，因为这样容易造成液体残留和飞溅，增加交叉污染的风险。轻微的抖动可以帮助去除残留液体，但要确保液体不会飞溅到其他孔中。
除了孔位置和甩板方式外，其他操作步骤也可能导致交叉污染。例如，加样时应避免枪头接触孔壁，洗涤时应避免洗涤液溢出。应严格按照试剂盒说明书进行操作，并采取必要的预防措施，以最大程度地减少交叉污染的风险。最终的孔设置请参考所用试剂盒的说明书。
3、用干净的滤纸，不要用卫生纸。ELISA洗板后，拍干残留液体是至关重要的步骤。为了避免污染和干扰实验结果，强烈建议使用干净的无尘纸或专用ELISA板吸水纸，而不是普通的卫生纸。
4、卫生纸通常含有细小的纤维和粉尘，这些物质容易脱落并粘附到孔中。这些污染物会干扰后续的反应，导致背景值升高或吸附待测物质，从而导致结果偏低或不准确。此外，卫生纸的吸水性也可能不如无尘纸或专用吸水纸，导致液体残留，影响实验结果的重复性。
5、正确的拍干方式是将ELISA板倒扣在干净的吸水纸上，并轻轻拍打板底，确保每个孔都充分接触吸水纸，以吸干残留液体。避免重复使用吸水纸，以防止交叉污染。使用干净且合适的吸水材料对于确保ELISA实验结果的准确性和可靠性至关重要。